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          你知不知道裂解液的成分也会影响自动核酸提取仪的提取效率

          发布时间:2022-03-08浏览:77次
            自动核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
           
            离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在1-12个样本,操作时间和手工提取差不多,并不能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。
           
            洗脱是解离吸附在磁珠上的DNA,得到纯度和浓度均很高的DNA,直接影响核酸得率,影响自动核酸提取仪洗脱效率的因素有磁珠的干燥程度以及洗脱温度和时间。
           
            一般核酸提取的主要步骤分为四步:裂解、吸附、洗涤和洗脱,每一步出现问题都会影响磁珠的提取效率,样本裂解是裂解细胞或病原体,释放里面的核酸。影响裂解的主要因素有裂解液的成分及裂解的温度和时间。
           
            1、裂解温度和时间:提高温度和增加裂解时间可以让细胞裂解更彻底,得到更多核酸,需要摸索合适的温度和时间;温度过高或时间过长,也有可能导致核酸断裂或醇类挥发导致的提取效率下降。
           
            2、裂解液成分:对于一些难裂解的样本,可以通过提高胍盐浓度以及表面活性剂浓度来增强裂解液的裂解能力。
           
            3、吸附是磁珠吸附核酸的能力,影响吸附能力的有磁珠的吸附能力以及结合缓冲液的结合能力。磁珠吸附能力受到磁珠比表面积以及修饰基团的密度影响。可根据实际样本选择磁珠粒径和修饰基团。

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